檢測試劑盒
這里來說說檢測試劑盒。
正如樹有高矮之分,抗體有活力高與低,親和力強和弱之分,一般來說,普通親和力與普通特異性的抗體已經能滿足免疫組化、免疫印跡或免疫熒光的要求,那更好的高親和力和高特異性的抗體是不是可以滿足更高層次的需求呢?
對于大部分人來說,免疫組化或免疫印跡等的操作方法還是過于復雜。而且實驗過程中部分樣品需要變性處理,人為的把有空間結構和有活性的蛋白變成線性和失去或部分失去活性的蛋白,再通過抗體去結合,它的好處在于只要是有目的蛋白存在,不管是有活力或無活力的形式,都是可以通過抗體識別出來的。那么有沒有一種更簡單易于操作的方法,并且可以在蛋白天然活性狀態下直接檢測的而不需對樣本進行預處理呢?
酶聯免疫吸附試驗(ELISA)和化學發光免疫分析(CLIA)就是這樣的能識別天然蛋白操作簡單的近代免疫學檢測方法。
酶聯免疫吸附試驗為免疫學中的經典實驗,通常其基本原理是:首先將一抗體包被到某固相載體表面,再將另一抗體與某酶連接成酶標抗體。在測定時,把受檢標本和酶標抗體按不同的步驟與包被抗體結合形成復合物。洗滌除去復合物以外的物質,最后結合在固相載體上的酶量與標本中受檢物質的量成一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化變為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據顏色反應的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,故可極大地放大反應效果,從而使測定方法達到很高的敏感度。
化學發光免疫分析包含兩個部分,即化學發光分析系統和免疫反應系統。免疫反應系統原理與酶聯免疫吸附試驗原理基本相同,只是連接的標記物為發光物質而不是酶,不需要顯色,由化學發光分析系統完成?;瘜W發光分析系統是利用化學發光物質經催化劑的催化和氧化劑的氧化,形成一個激發態的中間體,當這種激發態中間體回到穩定的基態時,同時發射出光子,利用發光信號測量儀器光量子產率?;瘜W發光免疫分析技術靈敏度高、特異性強、試劑價格低、方法穩定快速、檢測范圍寬、操作簡單更易于自動化。
通常情況下,免疫組化或免疫印跡只需一種是特異性抗體即可完成實驗,而ELISA或CLIA則需要二種特異性強且能識別有活性蛋白的抗體或局部片段抗體才能包被完成,因此,它的特異性及靈敏性優于免疫組化和免疫印跡就很好理解了。同樣原因于此,不是所有的抗體都能做為ELISA或CLIA的應用選擇,配對這一門檻將大部分抗體擋在了門外,它需要更好的高親和力和高特異性的抗體。
ELISA和CLIA方法學的應用極大的擴大了免疫學在科學研究以及臨床診斷上的運用,它操作簡單,不需專業背景的人也可操作,借助于微孔板清洗機和微孔板讀數儀或化學發光分析儀,實驗者只需要按照既定的步驟一步步添加就能獲得很好的實驗結果。全自動酶免檢測系統和全自動化學發光免疫分析系統的推出,徹底解放了整個實驗的全部過程,又快又準。
檢測試劑盒是一類便于使用的成套試劑,它可以用在哪些地方呢?可以起到什么作用呢?我們知道,蛋白質含量的高低可以直接反映生物體的生命狀態以及能預示患病的可能。比如,血液中T3、T4含量的升高可以預示甲亢的可能;尿液中微球蛋白的出現證明腎臟受損的可能;腦脊液中S100B蛋白的升高提示有腦部感染的可能?,F在我們只需要采集身體的一點體液就可以對體內的特定蛋白質運用ELISA或CLIA方法快速定量了。這種試劑盒其實就在我們身邊,在醫院里常做的乙肝“兩對半”檢查以及艾滋病檢查就是用ELISA試劑盒進行的,近年來,用于腫瘤檢測的試劑盒已不稀奇。檢測試劑盒還廣泛用于毒品與興奮劑的檢測,農藥殘留的檢測,水污染檢測等等。
分子生物學與免疫學的發展是有目共睹的,還記得2003年的非典嗎?不用說治療,就是確診都很困難。到現在,僅僅過去10來年,什么禽流感、豬流感,什么埃博拉、中東呼吸綜合征,僅僅出現幾天,它的祖宗八代都能夠弄得清清楚楚,抓住它的基因序列,獲取蛋白和抗體就不是難事,研制疫苗與抗體血清也有可能,拿出檢測試劑盒只是探囊取物。
云克隆公司近七千種檢測試劑盒主要是ELISA試劑盒,也有少部分是CLIA試劑盒,有雙抗夾心法與競爭抑制法之分。特色產品有檢測靈敏度高的高敏型檢測試劑盒;實驗耗時短,試劑使用方便的快捷型檢測試劑盒;以及只需要少量標本即可檢測的小樣本檢測試劑盒;用于檢測抗體的測抗體檢測試劑盒;用于檢測小分子物質的通用型泛物種檢測試劑盒;用于檢測二個物種以上靶蛋白的多物種檢測試劑盒。這些試劑盒目前基本上都只能用于科學研究,不用于臨床診斷,云克隆診斷試劑研究所正在著手逐步將部分指標轉化為臨床用體外診斷試劑。